新技能完成活细胞内线粒体蛋白质的原位构象和相互效果解析
发布时间： 2023-12-05 16:13:30 | 作者: 精油彩妆
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蛋白质是生物功用的执行者，其动态拼装介导的高维度信号传导贯穿于不同细胞器，并调控着许多生命进程。对细胞器中蛋白质原位构象和相互效果的时空动态改变精准解析，关于了解生命进程、提醒疾病机制、挑选生物标志物以及寻觅药物靶标具有极端重大意义。近来，中国科学院大连化学物理研究所张丽华研究员团队，在根据交联剂载体靶向投递的活细胞内线粒体蛋白质原位构象和相互效果解析方面获得新进展。相关效果宣布在《天然一通讯》。
本工作中，团队以双十八烷基二甲基溴化铵为靶向基团、以聚乳酸—乙醇酸为载体基质、以聚甲醛35氢化蓖麻油为保护剂，经过乳化溶剂蒸腾法，制备了高包埋交联剂双琥珀酰亚胺辛二酸酯的纳米颗粒。随后，在靶向基团辨认和保护剂的一起效果下，纳米颗粒将交联剂靶向投递至HepG2细胞线粒中，交联剂被开释后对线粒体中的蛋白质复合物进行原位交联。最终，团队使用液质联用判定交联肽段，对线粒体中蛋白质复合物原位构象和相互效果位点进行精准解析。该技能不只完成了活细胞内空间分辩的蛋白质复合物的低扰动原位交联，并且与已宣布的先别离细胞器再交联以及全细胞原位交联办法比较，抄获判定到更多的细胞器靶向的蛋白质复合物。
使用该技能判定到的线粒体呼吸链蛋白质复合物信息，不只与蛋白质晶体学结构或AlphaFold猜测的结构高度匹配，并且还供给了74对未报导的蛋白质—蛋白质相互效果信息，这些未报导的相互效果首要与氧化磷酸化的首要场所——线粒体嵴构成有关，这为深入研究线粒体的能量转化供给了技能支撑。
“这一技能将纳米载体初次拓宽到蛋白质复合物剖析范畴，为在活体水平展开靶向细胞器的蛋白质原位构象和相互效果解析供给了新思路。”张丽华介绍道。